嗯再见没见过
范文一：薄层色谱法分离菠菜叶片中色素的研究
第23卷第2期
2000年4月 河北农业大学学报Journal of Agricultural U niversity of Hebei Vol. 23No. 2
Apr. 2000
文章编号:1000-1573(2000) 02-0101-04
薄层色谱法分离菠菜叶片中色素的研究
果秀敏, 翟彤宇, 牛延锋
(河北农业大学基础部, 河北保定 071001) X
摘要:菠菜叶片中富含多种色素成分, 为了对其进行分离鉴定, 利用薄层色谱法着重研究了提取液、展开剂等因
素对色素分离的影响, 选择了石油醚(60~90e ) -无水乙醇(3B 2, V/V ) 的混合溶液作提取液, 石油醚(60~
90e ) -丙酮-苯(2B 1. 5B 2, V/V) 的混合溶液作展开剂的最佳条件, 单向一次性层析得到的7个斑点清晰、集
中, 简便快捷, 性能优异。层析后结合薄层扫描对其结果进行了鉴定分析, 取得了满意的效果。
关键词:薄层色谱; 叶绿素; 类胡萝卜素; 菠菜; 薄层扫描
中图分类号:O 65216 文献标识码:A
Study of seperating pigments from spinacia
using thin layer chromatography
GUO Xiu -min , ZHAI Ton g -yu, N IU Yan -feng
(Department of Basic Courses, Agr icltural U niversity o f Hebei, Bao ding 071001, China)
Abstract:The spinacia is rich in a variety of pigments. In order to separate and identify it, thin lay -
er chromatography was used to study how such factors as ex tractant, developping agent, etc influ -
ence the pigments seperating. T he experiment selected the mixture solution of petroleum ether(60~
90e ) and alcohol(3B 2, V/V ) as estractant, and the mixture solution of petroleum ether (60~
90e ) and acetone and benzene(2B 1. 5B 2, V/V) as developping ag ent, utilized the best conditions of
these solutions. The seperating result was seven spots. They w ere centralized and clear. The exper-i
ment w as easy and quick, and the result w as of high quality. After seperating, the result w as ident-i
fied and analysed by thin-layer scanning. It w as proved that the results w ere satisfactory.
Key words:thin-layer chrom atog raphy; chlorophyl; carotenoids; spinacia; thin-layer scanning
薄层色谱法具有操作简便、快速、分离效果好、适于微量分析等特点, 已应用于小麦、藻类、枸杞子等多种植物叶绿体色素的分离[1~3], 但利用薄层色谱法单向一次性分离鉴定菠菜叶绿素及类胡萝卜素的报道很少, 而对其影响因素的研究未见报道。本文研究了色素的量、展开剂、展开时间和距离等因素对薄层层析的影响, 应用于菠菜叶片中色素的分离鉴定, 斑点集中而清晰, 简便快速(展开只需10~15min) , 取得满意效果。
1 材料与方法
1. 1 样品制备
称取一定量的新鲜菠菜叶片(Sp inacia oleracea. L) , 剪碎, 置于研钵中, 按1B 1. 5加入石油醚(60~90e ) -无水乙醇(3B 2, V/V) 混合溶液, 适当研磨提取, 将提取液转入分液漏斗, 分2次加入等体积蒸馏水洗去水溶性物质及乙醇, 将含色素的石油醚层于暗处浓缩备用。
1. 2 制板
称取硅胶G 60型(青岛海洋化工厂, 薄层层析用) , 加入适量蒸馏水调成糊状, 用薄板涂布器制成薄层厚X 收稿日期:1999-09-09() , , ,
102 河北农业大学学报第23卷0. 25mm 供分析用的薄板, 凉干0. 5h, 110e 活化1h, 备用。
1. 3 展开
展开剂为石油醚(60~90e ) -丙酮一苯(2B 1. 5B 2, V/V ) 混合液。将点样后的薄板置于层析缸内, 浸入到展开剂中0. 5cm, 于暗处室温展开10~15m in, 标出斑点位置, 计算各斑点R f 值。
1. 4 光谱测定
待溶剂挥发后, 用日本岛津CS-930型薄层色谱扫描仪, 对各斑点在370~700nm 扫描可见光谱。2 结果与讨论
2. 1 菠菜中色素的薄层分离与鉴定
利用前述方法单向一次性薄板层析菠菜提取液, 分离出7个集中而清晰的斑点(图1) ; 测定各色素的R f 值, 并在370~700nm 处扫描出各点对应吸收光谱(图2) , 根据R f 值及光谱学特征吸收, 与文献报道值
o???比较, 分析不同色素结构差异, 确定各色斑依次为1B -胡萝卜素、去镁叶绿素a 、叶绿素a 、叶绿素b 、叶
??黄素、紫黄质、新黄质(表1)
。
图1 菠菜叶片中色素层析图
Fig. 1 Profile of chromatography of pigments from
spinacia 图2 各色素的吸收光谱图Fig. 2 Absorption spectrog ram of every pigment
图注:1. B -胡萝卜素 2. 去镁叶绿素a 3. 叶绿素a 4. 叶绿素b 5. 叶黄素 6. 紫黄质 7. 新黄质 8. 点样点
由表1可见, 1~4点的颜色、色谱行为和光谱学特征与文献报道值吻合, 因此其相应色素组成可以确定; 而5、6、7三个黄色斑点的主要吸收峰与文献报道值不完全一致, 但均具有类胡萝卜素的特征吸收(K max =450nm) , 说明系叶黄素类; 由于高等植物中叶黄素主要成分紫黄质(堇黄质、紫玉米黄素) 和新黄质(新叶黄素、新玉米黄素) 的末端基团不同, 因此具有不同的色谱行为, 新黄质含有3个羟基, 与硅胶G 中硅醇结合较紧, 展开速度较慢, 紫黄质含有双羟基及双环氧, 其展开速度应慢于仅含双羟基的叶黄素而快于新黄质, 故推断5、6、7点为叶黄素、紫黄质及新黄质。至于与文献吸收峰的差异, 可能与溶剂的影响有关, 据文献报道, 不同溶剂中同一色素吸收峰存有差异, 本方法采用薄层扫描仪直接测定溶剂挥发后的各斑点, 避免了传统测定方法中的溶剂干扰, 因此结果更为准确可靠。[3]
第2期 果秀敏等:薄层色谱法分离菠菜叶片中色素的研究
表1 菠菜叶片中色素分离鉴定结果
Toble 1 The separation and identif ication result of spinacia . s pigments 103
序号
Order
1
2
3
4
5
6
7颜色Colour 桔黄暗灰蓝绿草绿黄色黄色黄色色素名称N ames of pigment B -胡萝卜素去镁叶绿素a 叶绿素a 叶绿素b 叶黄素紫黄质新黄质R f 值R f v alue 0196018301700163015201380119主要吸收蜂/nm M ain absorpt ion peaks 测定值文献值[3]Determinatio n value Reference value 455405, 540, 612, 662451(正己烷) 450(石油醚) 408, 534, 614, 664(乙醚) 430, 618, 664(乙醚) 457, 550, 595, 646(乙醚) 457, 484(氯仿) 450, 481(氯仿) 448, 478
(氯仿) 430, 620, 664460, 550, 595, 648450, 595452, 5904521590
2. 2 影响薄层层析的因素
2. 2. 1 色素量的影响 10g 鲜菠菜叶, 分别以1B 1, 1B 1. 5, 1B 2, 1B 3比例加入提取液, 同法提取, 展开; 结果以1B 1. 5提取所显示的斑点多而清晰, 效果最好。
2. 2. 2 展开剂的影响 展开剂的选择是达到良好分离的重要
条件之一。根据文献报道选用了一般公认为最好的石油醚-丙
酮-苯溶剂系统, 对其配比和极性差异进行了试验, 发现溶剂的
极性对色素的比移值影响很大, 比移值随着溶剂极性增加而增
大, 出现斑点的数量亦有不同(图3) 。当展开剂体积比为2B 0. 5
B 2时, 由于极性较小, 除胡萝卜素推到溶剂前沿外, 其它各点均
未超过板高的1/2, 且叶绿素a 与叶绿素b 互相掩盖未能分开,
第6、7黄点也未出现; 配比为2B 1. 0B 2时, 比移值增大, 但仍只
可分出4个点; 随着溶剂极性增加, 比移值逐渐增大, 分离效果
增加, 最为理想的配比为2B 1. 5B 2, 可使7种色素清晰分开且分
布适中; 配比2B 1. 7B 2也可达到较好分离效果, 只是R f 值较大,
叶绿素a 与叶绿素b 分离较晚; 配比为2B 2B 2时, 虽仍可分出7
个色斑, 但各点已超过板高的1/2, 过于集中。图3 展开剂配比对R f 的影响21213 展开时间和距离 展开10~15min, 展开距离为6~10Fig. 3 The influence of unfolded cm 左右时, 色素已完全分离、斑点清晰而集中, 在此范围内展开reagent . s distribution on Rf
时间及距离对比移值无明显影响; 若展开距离过长, 则展开时间11胡萝卜素; 21去镁叶绿素a; 31叶绿素a;
41叶绿素b; 51叶黄素; 61紫黄质; 71新黄质相应延长, 不仅费时而且色素的斑点逐渐发生扩散、颜色渐淡。
因此, 认为展开时间10~15min 和展开距离6~10cm 可达到分离效果, 简便快速。
21214 其它影响因素 提取液的影响, 本法重点观察溶剂的极性及配比对层析的影响。对石油醚、丙酮、95%乙醇、无水乙醇等几种溶剂的配比试验结果表明, 以石油醚) 无水乙醇(3B 2, V/V) 为提取液效果最好, 可分离出7个清晰的色斑, 而石油醚) 95%乙醇(2B 1, V/V) 及石油醚) 无水乙醇(2B 1, V/V) 的提取液, 只可分离出4或5个点。样品处理方法的影响, 由于鲜叶中含有多种酶, 是否对层析有影响尚未见报。本试验将鲜叶与干叶(95e 烘箱干燥5m in 以中止酶活性) 同法层析, 结果确有差异:干叶经层析分离出8个色素斑点R f 8, , 01
104 河北农业大学学报第23卷物质的极性较大, 其颜色及光谱吸收峰(410, 495, 612, 675nm ) 与去镁叶绿素a 很接近, 但其R f 值差异较大, 推测可能是去镁叶绿素b, 或者是干燥除酶过程中, 色素产生分解或结构变化所致, 其具体成分及机制尚待进一步证实。
薄层色谱单向一次性地分离菠菜中的色素, 其突出优点是分离效果好、简便快速, 在短短10~15m in 内, 即可一次性地将叶绿素和类胡萝卜素展开分离, 斑点清晰而集中, 优于柱层析和纸层析, 因而当实际定性分析时, 在层析后, 根据层析图谱或R f 值计算, 就可以初步判断所含色素种类; 另外, 结合薄层扫描还可进一步定性或作定量分析。
参考文献:
[1] 杨模坤, 黄良月. 叶绿素的研究ò:叶绿素和类胡萝卜素的薄层层析[J].植物生理学通讯, 1964(6) :4-81
[2] 潘俊海, 张宪孔. 藻类叶绿素和类胡萝卜素的快速薄板层析法[J]. 植物生理学通讯, 1990(3) :51-531
[3] 彭光华, 李忠, 张声华. 薄层色谱法分离鉴定枸杞子中的类胡萝卜素[J].营养学报, 1998(1) :76-781
(编辑:郭桂仙)
(上接100页)
种子与接种盒内壁相碰。由此当排出的多粒种子与接种盒内壁碰撞时, 互相分散。
(2) 种子向心倾向的运动
在排种轮转速较低时, 种子的离心力较小, 型孔中的种子在重力的径向分力作用下, 产生向心运动趋势。它不与接种盒内壁相碰, 也不会滑落至大孔前壁, 而是以不同的先后顺序, 顺次直接排出型孔。
3. 4 投种口尺寸对排种性能的影响
由于小麦种子的不规则性, 流动时产生翻转, 落地时产生弹跳, 因此很难实现对小麦种子的粒距和穴距要求。依据5要点6[3, 4]规定, 要求小麦种子在5cm 苗幅范围内均匀分布, 满足小麦生长的农艺要求。投种口尺寸的增大, 型孔中的多粒小麦种子经过接种盒的碰撞或按先后不同的顺序顺次排出, 避免了因小麦种子同时排出, 在田间成撮或成堆排放现象, 影响排种均匀性能。同时由于小麦种子的提前释放, 使种子有足够的时间滑出型孔, 避免型孔中的种子挤伤或被排种轮带走现象。
4 小结
1) 在护种区内, 种子有两种运动趋势, 一种是向心运动, 一种是离心运动趋势, 且与壳体内壁相碰撞。
2) 增大投种口尺寸为P /2时, 型孔内的种子提前滑落投种或甩出投种, 可提高排种均匀性。
参考文献:
[1] 马连元, 刘俊峰, 崔和瑞, 等1内侧充种垂直圆盘排种器的结构、原理和应用[J]1农业机械学报, 1996, 27(增) :43-471
[2] 张海飞, 马连元, 田春梅, 等1内侧囊种垂直圆盘排种器护种机理的研究[C]1耕作机械学会论文集1北京:中国农机学
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[3] 余松烈1小麦精密播种技术[M ]1北京:农业出版社, 1995183-841
[4] 董进武1小麦精少量播种机械化[M ]1北京:中国审计出版社, 1996189-931
(编辑:李 宇)
范文二：薄层色谱法分离菠菜叶片中色素的研究
第２３卷第２期２（Ｈ）０年４月
文耄壤警：ｌ鲫０一｛５７３｛２０００｝０２一棚０ｌ一０４
河北农业大学学报
ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｇ“ｃｕｌｌｕｒａｌｕｎｌｖｅｒｓｉｔｖｏｆＨｅｂｅｊ
ｖ０１．２３Ｎｏ２
Ａ口ｒ．２０００
薄层色谱法分离菠菜叶片中色素的研究。
蓦秀簸，器影字，孚廷锋
（河北农韭大学纂础部．河北保定舯１００¨
摘要：菠菜叶片中富音多种色素成分，为了对其进行舟离鉴定．利用薄屡色谱法着重研究了攫取液、展开荆肆因素对色素分离的黟响，选择了石油醚（砷一９０屯）一恿小己醇（３：２．Ｖ／ｖ）的混台溶液怍提取菠．石油醚（６０—９０℃）一再理一苯（２：ｌ５：２，Ｖ／Ｖ）驰燕奇落菠捧燕扦裁嚣最佳斋释，单向一曩挂呈辑搏到翡７夺斑点灌糍、巢串，蓠便饶捷，髓能优异。层辑蓐簿蠢簿晏扫摇霹其簪皋连行彳蓥定分棰，取得了满意砖藏慕。关键词：薄醛色谱；叶绿素；粪桶萝ｈ素；菠菜；薄层扫描
中围分类号：Ｏ６５２
６
文献棒识鹤：Ａ
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薄层色谱法具有撵作簿便、快建、分离效莱好、邋子敲量分析等特点，已应角予小麦、藻类、鞫耗子等多种
植物叶绿体色素的分离＝１。１，但利用薄层色谱法单向一次性分离鉴定菠菜叶绿索及类胡萝ｈ素的报道很少，
而对其影响因素的研究未见报道。本文研究了色豢的量、展开剂、腱开时间和距离等因素对薄屡层析的影响，反用于菠菜叶片中色素的分离籀定，斑点集中面清晰，简便快速（展开只需１０～１５ｍｉｎ），取得满意效果。
ｌ材将与方法
ｌ，ｌ样品制备
称取～定量的新鲜菠菜叶片（却执ｎｃ缸。拓ｍｃ∞．Ｌ），剪碎，嚣乎研钵中，按１：１．５加入石油醚（６０～
∞℃）一无承乙醇｛３：２，Ｖ／Ｖ）混合溶液，适当骚壤攫取，将提取液转Ａ努渡磊斗，努２敬棚人等体积蒸馏瘩
撬去永溶毪豹质及己簿，将含色素的匿油醚层于啼处滚缩备用。１．２制板
称取硅胶Ｇ。型（青岛海洋化工厂，薄层层析用），加人适量蒸馏水调成糊状，用薄板涂布器制成薄层厚
睾筏疆日糍：１９始一姻一０９
作者简介：果番敏（１９６９一），女，河北玉田县凡，从事化学教学和宾验工作
万方数据
１０２
河北农业大学学掇
ｍｍ供分析用的薄板，凉干Ｏ．５ｈ，１１０℃活化１ｈ，备用。
第２３卷
０．２５
１．３展开
展开荆为石油醚（∞一９０℃》一丙酮一苯（２：ｌ，５：２，Ｖ／Ｖ）混合渡。将点撵嚣的薄板鬟手层拆缸逡，浸
入到展开剂中ｏ．５ｅｍ，予暗处室濑展开ｌｏ—１５ｍｉｎ，标出斑点位置，计算各斑点辑值。１．４光谱测定
雉溶剂挥发后，爆日本岛津ｃｓ一９３０型薄屡色谱扫描议，对各斑点在３７０—７∞ｎｍ扫搂Ｗ觅光谱。
２结栗与讨论
２．１
菠菜中色素的薄展分离与鉴窳
裁用藏述方法荸爨一次牲薄投屡接菠菜掇致渡，分离窭７拿集孛两蘧瘊懿凝点（匿１）；潮定各色褰鳃
坼值，井在３７０～７００ｎｍ处扫描出备点对应暇收光谱（圈２），根据≈值及光谱学特征吸收，与文献报道值比
较，分析不同色素结构擞异，确定各色斑依次为。Ｂ一胡萝ｈ素、。去镁叶绿素ａ、。叶绿素ａ、。叶绿素ｂ、。叶黄寰、。紫黄质、。耨黄震（表１）。
０
３０
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垂莲：ｌ。８一龌萝｝豢２．去镁砖缘寮ａ３哮缘褰Ｅ
４蚌鳝囊ｂ５。哮黄褒６紫黄蘸７，囊黄蓑８．点徉点
由表１可见，１－４点的颜色、甑谱行为和光谱学特征畸文献报道值吻合，因此其相应色索组成可以确定；面５、Ｆ、７三个黄色斑点鳇主要啵收蜂与文献摄遭值不完全一致，挺均具有类蠲萝｝素的特征吸收（Ａ一
＝４５０
ｎｍ），说明系咔黄素类；由于离等植物孛种黄素主要成分紫黄髓（堇黄质、紫玉米黄素）和新黄质（糯许
黄素、新玉米黄素）的朱端基团不同，因此具有不同的色谱行为，新黄质古有３个羟基，与硅胶Ｇ中硅醇绺台较紧，展开滤度较慢，紫荧质含有双羟基及双耶氧，其展开速度应慢于仅含双羟基的叶黄素而快于新黄质，故援辑５、６、７点势辞黄素、綮黄爱及赫黄凄。至予每交麸暇琏雯蜂懿差异，霹麓与溶裁的澎璃有美，据文敲摄遘，不同溶剂中阔一色素吸收峰存有整舁”ｏ，率方法采用薄层扫描仪直接测定溶剂挥发后的各斑点，避免了传统测定方法中的溶剂干找，因此结果夏为准确可靠。
万方数据
筹２期
皋秀壤等：薄层皂避法努襄菠菜哮冀中色塞的研突
１０３
２，２影响薄滕屡析的因赘
２．２．１
色素薰的帮畸∞ｇ藓菠菜叶，势澍联ｌ：ｌ，ｌ：１．５，ｌ：２，ｌ：３眈衡蕊Ａ提墩滚，鞫法提取，最开；
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结果以ｌ：１．５提取所显示的斑点多而清晰，效果最好。２．２．２廉舞裁砖嚣蝻
簸件之一。根据文献报道选用了一般公认为最好的石油醚一两戮一苯褡蓑系统，辩其醚魄相投馁差箅遴行了试验，发溪溶翔豹
投性对媳索的比穆簸影响很大，比移值随着溶剡极性增加面增
太，盅瑷斑赢鳃散螽赛番不同（雕３）。警展开翔瘁获跑隽２：０。５：２时，出予极性鞍小，狳勰萝｝素搀到溶剂前沿外，其它番点均米勰过扳海静ｌ／２，且叶绿索ａ与叶绿素ｂ互栩掩盖来髓分开，第６、７黄点也蓉出现；配比为２：１．ｏ：２时，比移佳增大，憾仍其Ｗ分出４个点；醚着溶剂极性增加，比移值逐渐增大，分舞效果增加＋最为理想的嬲比为２：１．５：２，可使７种色素清晰
．
。
ｏ
８８
分开且分布适中；配院２：１．７：２也可遮蓟较盎子分离效果，风起Ｒ，值较大，叶绿素８与时绿素ｂ分离较晚；配比为２：２：２时，最仍可分出７个色斑，但备点已越过板高的ｌ／２，过于集中。２．２．３展矛时垮和璺齄离展开ｌＯ—１５ｍＩｎ，展扦距离为６一ｌＯｏｍ左右时，色索已究盘分离、斑点清晰丽集中，在此魏瑚内展开时闽及藏离对比移饿戈明照影响；若曩野距离越长，则展开对蝴
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１?胡萝ｈ索；２?去镁叶绿豪ａ；３叶绿豢“４＾糖绿素５；５?非黄煮４６繁鼗蕨；７｝凝黄震
鞠踅，试为聂搿辩誊翔１０一１５ｍ扭翻震开难离６～ｌｏｅｍ遐达到分离效果，麓挺抉逮。
２．２。４其它影响霹嵩提取液的影响，奉法羹点观察溶剂的极性获醚院对屡析的影响。对石油醚、丙酮、擘５％乙鼯、无农艺静等死耱溶裁酌配毙靛验壤豢表疆，疆磊洼疆一戈零乙醇（３：２，Ｖ／￥）为提取渡效聚最好，Ｗ分离出７个清晰的色斑，而石油醚—母５％乙酵（２：ｌ，Ｖ／Ｖ）及石油醚一无水己酵（２：ｌ，Ｖ／Ｖ）的掇鞭液，鼹霹分离蕊４或５个患。撵菇娃瑗方法的影ｌ自，痰于鼙挣｝凄ｊ食蠢雾静簿，蕊秀辩鼹辑有影响巍｜寒觅投。奉试验将鲜叶与干叶（９５℃烘精干燥５ｍｉｎ以中止酶活性）同法层析，结果确有靛异：千叶经屎析分离出ｓ个色素斑
万方数据 ０９，巍嬲谈点，蔻７个斑患戆攘凭、藓经与鳞咛基奉捃霜，辇８点魏暗藏趣，与患撵煮相薤疆近，霆，夔仅为ｏ
１０４
浮浅农业大学学撮第２３罄
物质的扳性较大，其颜色及光谱吸收峰（４１０，４９５，６１２，６７５ｎｍ）与去镁叶绿素ａ很接近，但其拂值差异较大，推测可能是去镁叶绿索ｂ，或者是干燥除酶过程中，色素产生分解或站梅变化所致．其具体成分及机制尚待避一步甚蜜。
薄层色谱单向一次性地分离菠菜中的龟紊，其突出优点是分离效果好、简便快速，在瓶短ｌｏ一１５
ｍｉｎ
内，即可一次性地将叶绿素和类胡萝ｈ素展开分离，斑点清晰而集中，忧于柱层析和纸层析，因而当实际定性分柝时，鑫鼹柝后，根据屡柝图谱城冠，值计算，就可鞋初步判断所窘色素种类；男掺，结台薄屡据搓还可遴一步定性或作定量分析。
参考文献：
ｌｌ：辑摸捧，羹囊莠。辞绿素懿瑗突嚣：砖绿素纛樊辘爹｝素懿薄袋岳甍ｉｊｊ．绦耘生理学运溅，｛％４（钓：４一ｓ．：２ｊ
：３：
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彭光华，李忠，张声华薄层色培｛击分离鉴定枸杞子中的类胡蓼ｈ素［Ｊ。营养学报，１９９８（１）：７６—７８
万方数据
（编辑：郭桂铀）
薄层色谱法分离菠菜叶片中色素的研究
作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次数：
果秀敏， 翟彤宇， 牛延锋
河北农业大学学报
JOURNAL OF AGRICULTURAL UNIVERSITY OF HEBEI2000，23(2)10次
引证文献(10条)
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3. 吴远远. 孟哲. 刘红云. 王力川 蔬菜漂烫过程对营养性成分保持的影响[期刊论文]-理化检验-化学分册 2008(4)4. 胡斌. 陈达. 苏庆德 压电光声位相对热扩散率的分析研究[期刊论文]-光谱学与光谱分析 2007(9)
5. 庄川灵. 胡馨月. 曹建平 长江口外冲淡水区悬浮颗粒物中总有机碳和叶绿素a的碳同位素分布[期刊论文]-厦门大学学报（自然科学版） 2007(z1)
6. 刘金海. 王安利. 王维娜 金鱼总色素及色素组分的比较研究[期刊论文]-水生生物学报 2007(1)
7. 李赫. 陈敏. 马文平. 王静钰 不同成熟期枸杞中类胡萝卜素含量的变化规律[期刊论文]-中国农业科学 2006(3)8. 王巍杰. 贾晓冬 菠菜叶中叶绿素a和其他有效成份的分离提纯[期刊论文]-河北理工学院学报 2006(2)9. 王安利. 刘金海. 王维娜 锦鲤总色素及色素组分的比较研究[期刊论文]-水生生物学报 2005(6)10. 王海滨 菹草红色类胡萝卜素的结构表征及其抽提物生理活性研究[学位论文]博士 2005
本文链接：http://d.g.wanfangdata.com.cn/Periodical_hbnydxxb200002027.aspx
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范文三：观察叶片的结构
教学准备：
1、准备新鲜的叶片——天门冬、菠菜叶。
2、根据课本准备实验《观察叶片的结构》的材料用具。
3、叶片的结构模型。
4、FLASH：绿色植物叶片的结构。
5、视频文件：（1）叶的生长；（2）植物的光合作用
植物光合作用的场所
黑龙江省宁安第四中学 关革斌
教学设想：通过练习徒手切片，培养学生的实验能力；通过观察叶片的结构，了解叶片是光合作用的主要器官。通过演示课件使学生了解叶绿体是光合作用的场所。在这一学习活动中，贯穿师生互动性，体现学生的主体作用，培养学生认真、耐心、细致的学习态度。
教学器材：显微镜、双面刀片、镊子、滴管、载玻片、盖玻片、培养皿、菠菜叶、干净的纱布、叶片的横切面永久性切片标本、电脑、实物投影仪，投影电视等。
教学过程：
上课了，教师拿起一片植物的叶子，学生的注意力集中过来。
师：叶子由哪几部分组成，哪是主要部分？
生：叶子由叶柄和叶片组成，主要部分是叶片。
师：同学们回答得很好，一片完整的叶子由托叶、叶柄、叶片、三部分组成，最明显的是叶片和叶柄部分（用手指出），那么为什么说叶片是叶子的主要部分呢？
生：因为叶片是植物进行光合作用的主要器官。
师：回答得很准确， 那么叶片适应光合作用的结构是怎样的呢？带着这个问题，我们来练习作叶片横切面的徒手切片。
教师打开实物投影仪，在投影仪上边演示边讲解，同学们都认真观看屏幕上老师的演示。 老师首先将菠菜叶纵向切成条状，然后取出一条，将双面刀片刀尖顿平，在叶片上横向迅速划出，再将刀片在培养皿的水里轻轻摆动，于是一条细如发丝的绿丝出现在水里。同时映现在屏幕上。学生看了都兴奋不已，跃跃欲试。老师按同样的办法又作了几条，最后作了一个叶片的横切面玻片标本放在显微镜的载物台上，准备观察。
学生开始作叶片横切面玻片标本，课堂开始“闹哄”起来。老师则穿梭于各实验组之间，进行点拨指导。
１５分钟后，老师回到讲台，让同学们停下来，这时有的同学仍在认真的做着，争执着，观察着，仿佛没有听见老师的话，渐渐的学生安静下来。老师请完成实验的组举手，有１５组；请没完成的组说出在学习中的困难，然后让学生帮助解答，不足之处老师补充，最后请同学们说出观察到的现象。
生：我看到的像是一条黑绿色的虫子，虫子两侧是透明的。
同学们都笑了！
师：那么你能说出透明部分是什么结构吗？
生：是表皮。
师：回答正确，那么黑绿色的部分是什么结构？
生：黑绿色的是叶肉和叶脉。
师：很好，有没有看得更清楚些的？
生：我看到的与永久切片基本一样，只是颜色更绿一些。
师：这位同学不但能够完成老师布置的任务，而且能够提前做出对比观察，老师提出表扬。现在我们分析一下上一位同学所做切片的结构不清楚的原因。
生：是因为切片太厚了，不够透明。
生：也可能没有在载玻片上滴一滴清水，会影响观察叶片的结构。
师：这两位同学概括的很好，在做实验时勤于思索，善于总结，我们给予表扬。现在，请同学们一起看叶片的永久横切片标本。
学生开始将永久横切处标本放在显微镜下观察，并对照自己做的切片标本进行对比观察。
教师将从远程教育网上下载下来的与横切面相一致的切片图投射到屏幕上，让同学去仔细观察。并让学生进行总结。
学生总结：外层透明的是表皮，分上下表皮，有表皮细胞和保卫细胞。
教师拿一片叶在上面滴了几滴水，水滴顺叶面滑下。
师：这说明了什么？
生：表皮细胞具有保护作用，表皮细胞的外壁有一层角质层，使叶片不受细菌侵害，控制水分的散失。
师：表皮上面的保卫细胞成什么形状，中间的孔隙叫什么？
生：成椭圆形，叫气孔。
师：同学们，注意，观察要细心，保卫细胞是一对，下面我们观察一下气孔的开闭的模拟动画（从远程教育网下载）。老师操作，学生认真看。
师：现在请同学们再说一下保卫细胞成什么形状。
生：成肾形！
生：成月牙形！
师：回答正确，气孔的功能呢？
生：气孔是叶片进行气体交换的门户。
教师把图片返回到第一幅图。问：同学们现在看中间部分，我们称为？
生：叶肉。
教师拿起一片叶子，让同学们看叶子的上表面与下表面有什么区别。
生：上表面叶片颜色深，下表面叶片颜色浅。
师：为什么？你们发现它们在排列上有什么不同？
生：发现贴近上面的组织细胞排列整齐，含叶绿体多；下表面组织细胞排列疏松，含叶绿体少。
师：我们称上部的为栅栏层，下部的为海绵层。那么，现在同学们再想一想叶片的颜色，是表皮的颜色还是叶肉的颜色？
生：是叶肉。
教师在屏幕上指着叶脉说：分布在叶肉中间的这种管状物是什么结构，有什么作用？ 生：是叶脉，具有输导水分、无机盐和有机物的功能。
教师拿起两把扇子，一把扇骨已折，另一把扇骨完好。
师：请同学们总结叶片的另一种功能。
生：具有支撑作用。
教师拿出叶脉书签让学生观看，掌握叶脉分布在叶子每一部分的特点。
老师将教科书图６－７中的叶绿体用实物投影仪投射到屏幕上，师生共同观察。让学生认识叶绿体。
师：为什么说叶片是植物光合作用的主要器官？
生：叶片的叶肉细胞和保卫细胞中含有叶绿体，叶绿体又含有叶绿素，而叶绿素能够吸收光能，为光合作用提供能量。叶片的颜色实质是叶绿素的颜色。
师：回答正确。同学们，思考一下，叶片的其它结构为什么有利于进行光合作用。 生：表皮透明即起到保护作用，又有利于叶肉的叶绿体吸收光能。
生：叶脉能够为光合作用输送水和无机盐；能将光合作用的产物运到各器官。
师：正确。叶绿体是绿色植物进行光合作用的场所，所以没有叶绿体，绿色植物就不能进行光合作用。叶绿素只有在光下才能形成，所以叶绿体没有形成叶绿素，也不能进行光合作用，制造有机物。
运用课件深入浅出的阐述叶绿体、叶肉细胞、叶片的关系。
(叶片------工厂、叶肉细胞------车间、叶绿体------机器)
师：我们总结一下这堂课的收获。
生：我学到了叶片是光合作用的场所和叶片的结构的知识。
生：我学到了光合作用只有在光下才能进行，叶绿体只有在光下才能生成叶绿素，没有叶绿素就不能进行光合作用，叶绿体是光合作用的场所。
师：这两位同学总结的很好，那么除此以外，你还学到了什么？
生：学会作徒手切片标本。
生：我懂得了做实验要耐心、细致，越慌越乱。
这时同学们都笑了，原来是刚才切片做成“绿虫子”的那位同学。
师：这两位同学总结的也很好。同学们还有什么问题？
生：刚才在观察叶片永久横切片时，我发现叶肉细胞之间有空白的地方，那是什么？ 师：这个问题，我没有注意到，下课后，我查查资料，再给你解答。同学们可以讨论一下。不过我要表扬你善于发现问题，敢于提出问题。
生：我家有一盆花，叶子呈紫红色，那么它是怎样进行光合作用的？
师：这种花叫紫鸭跖草，如果你回家仔细观察一下那盆花，你就会知道答案了。 生：秋天叶子变黄、变红是怎么回事？
师：这个问题比较简单，你们问一下初二的同学或查查资料。今天我们的课就到这。
后记： 这是我校课程改革中的一堂推进课，整体看来知识传授准确、到位；技能培训，情感、态度的培养都在整个教学过程中得以体现。但如果按课程改革标准来看，仍侧重于知识的传授。如投影电视、实物投影仪，远程教育网、课件、电脑等现代教育手段的运用都侧重于对知识的理解、掌握。当然这些手段的运用提高了对这些知识技能掌握的效率。在实验――叶片横切面切片的制作与观察中，有１０个实验组没有完成，教师没有给与充分的时间让他们完成这一教学任务，从而达到面向全体学生的目的。学生没有在 作临时切片时直
接分出栅栏层和海绵层，而失去对学生在做实验时，尤其是观察实验现象时要进行耐心、细致的情感态度的培养的机会。
几个亮点：
１、对叶片结构与功能相适应的分析，即叶片是光合作用主要器官的理解。
２、气孔开闭模拟动画的应用。
３、第一个实验材料替换，对第二个实验相应改变。
４、学生最后几个问题的提出与教师的解答。
我觉得一堂好课学生不仅要学到知识，还应收获问题。
反思：后来同授课教师交流了一下。发觉授课教师对教学过程是一交
流合作的过程，认识上有差距。因此，课堂上的交流是单向的，师 生，而不是生 师、生 生的双向交流合作。只有认识到一点，才能实现教师的授课过程，也是学习的过程。教师不但要传授知识，还要从学生身上学到知识，因为在交流、合作中学生身上也在不断的产生新知识。学生不但在学，而且也在教，师生互动充分体现学生与教师的双主体作用。 备注：１、中国远程教育网（网址： btjhj@95777com）
２、 课件二个
参考文献：《人民教育》
建议：能否提供在北方能够取代黑藻的生物实验材料。
教师引入：
（1）藕是莲的地下茎，是蔬菜中的佳品。莲的叶叫荷叶，可用来
包裹食物。但如果大量采摘荷叶，就会影响藕的产量。在其他生
长条件相同的情况下，为什么过量采摘荷叶会影响藕的产量？
（2）有一次老师在看电视中“每日农经”这一栏目时，正播放“瓜农大赛”。主持人问瓜农：我们的记者采访你的时候为什么不让进瓜园？瓜农说，你若碰坏了瓜叶，瓜就不长了。
在这两种现象中都提到了叶，叶为什么这么重要，它在植物的生长过程中有什么作用？
（3）学生提出猜想
师总结：每个人都准备了不同的叶片，我们一起来探究叶的结构特点，看一看叶到底有什么
作用。
一、学生观察叶的结构特点、提出猜想疑问
学生活动： 四人一组，组内交流叶片，共同观察探究，分析归纳获得的信息，记录疑问。
全班交流。
组1：我们发现叶的正面颜色深，背面颜色浅，
组2：绿色是叶绿素显示出来的，我们猜测可能是叶的正面含的叶绿素多，所以颜色深，
背面含的叶绿素少，所以颜色浅。
组3：每个叶片都有叶脉，当我们切断菠菜叶的叶脉时，发现叶片弯折，耷拉，我们认
为叶脉像叶的骨架，有支持作用。
组4：当我们切断薄公英的叶脉时、发现叶脉断口处有白色的液体流出，我们认为叶脉
是导管，有运输的作用。
组5：虫子吃剩的皮是无色透明，我们推测表皮细胞没有叶绿素。叶的正面有皮，背面
也有皮，皮位于叶片的最外面，像种皮和人的皮肤似的，有保护作用。
如学生不能提到这样的问题时教师可做如下提示：①大雨过后，一些植物的叶片上常有水珠
滚动，却不会渗入叶片内部，这是为什么？②你注意观察过吗，落地的树叶是正
面向上的多还是背面向上的多？
学生活动：积极动手操作，思考，一致认为：叶片不易吸收水。
教师引导：请大家拿起一片叶，擦去叶表面的杂质，举高点，松手，让叶片自由落下，观察
叶落地时哪面向上。
学生活动：动手操作，
统计结果：观察到叶片正面向上的人举手，统计人数。
观察到叶片背面向上的人举手，统计人数
学生总结：叶落地的时候正面向上的机会大，背面向上的机会小。并猜想原因
教师活动：教师根据学生的发言，整理、板书（用以指导下一个学习过程）
二、制作叶的横切临时装片并进行观察，验证猜想
设计意图：进一步熟练显微镜的使用方法，尝试制作叶的横切临时装片，并用显微镜观察叶
片各部分结构，在操作的过程中培养学生的动手能力。体会科学家进行科学探索
的科学精神和科学方法。
教师总结：通过刚才的观察和分析我们了解了叶的一些特点，结合我们的生活 经验做出了
一些假设，也有人提出了疑问，要知道这些假设是否成立、这些问题的答案是什
么，还得进一步了解叶的内部结构，这就要用到显微镜。用显微镜观察物体时，
先把要观察的物体制成临时装片，对照课本34页图，制作叶的横切临时装片，
并用显微镜观察。
学生活动：观察课本34页中装片的制作方法，交流操作过程中的注意事项。小组内制作装
片
教师活动：巡视指导。
学生活动：汇报观察到的结果
学生：视野中只看到很浓重的绿色，看不清叶的内部结构。
学生：做的不成功，也无法分辨叶的内部结构。
教师活动：引导学生分析失败的原因。
学生回答：显微镜只能观察透明的物体，我们做的装片可能太厚。
教师总结：还有一种可能，你们在切的时候动作比慢，或不是一次切出的，破坏了叶的结构，
所以观察不到。这个装片的制作过程虽然简单，但很难切出薄到透明又不损伤叶
结构的薄片。但老师给大家准备了叶的横切永久装片，我们可以直接观察。
三、观察叶的横切临时装片
设计意图：通过观察掌握叶片的基本结构特点，分析其功能，引导学生体会结构与功能相适
应的关系，在探究的过程中培养学生的综合、逻辑、归纳、推理、分析的思维能
力逐步建立“结构与功能相适应”的生物学观点。
教师活动：分发装片，叶结构模型，贴叶的结构挂图。
提出要求：在观察的过程中，结合课本、挂图、模型，认识叶的结构，理解结构与功能相适
应的特点。验证刚才的假设是否成立，解决疑问。
学生活动：动手观察，寻找理论依据验证刚才的猜想。
教师活动：巡视指导。
学生活动：交流汇报自已的收获
组1：叶脉是由一些成束存在的细胞组成的，里面有导管和筛管，导管能将水和无机盐
输送给叶肉，水是进行光合作用的原料，筛管能把光合作用制造的有机物运输
到其他的器管。
组2：（指示模型），我们小组观察到叶片的表皮是由一层排列紧密的活细胞组成，表
皮分上表皮和下表皮，表皮细胞中没有绿色的小颗粒，不含叶绿体，所以没有
颜色，是透明的。
组3：表皮的外部还有一层角质层，我们小组认为叶片不易透水是因为角质层的缘故。 组4：我们非常同意刚才两个小组的意见，表皮的这些结构既有利于光线的透入，又能
防止叶片内水分过多散失而且对叶片还有保护作用。
组5：表皮上有气孔，而且上表皮的气孔分布的比较稀，下表皮的气孔分布的比较密。
二氧化碳和氧气可以通过气孔进出叶片
组6：叶肉是整个叶片的主体部分，由很多叶肉细胞组成，这些细胞有很大的差别，接
近上表皮的细胞形状比较规则，近似圆柱形，排列比整齐，这部分属于栅栏组
织。里面含的叶绿体多，所以颜色比较深，也比较重。接近下表皮的细胞形状
不规则，排列比较疏松，中间空隙大，这部分属于海绵组织，里面含的叶绿停
体少，所以颜色比较浅，也比较轻。
教师质疑：是因为栅栏组织含的叶绿体多才比较重，海绵组织含的叶绿体少才比较轻吗？
学生：好像不是，但我不知道为什么。
四、学以致用，指导实践
教师启发：生活中，如何运用我们这节课的知识去指导农业生产？
学生回答：植物多长叶可以制造、积累有机物，提高农作物的产量。
（问题处理）当学生不能说出其他方面时教师可以引导：在单位面积的土地上我尽量密植，
以达到多长叶高产的目的可行吗？
学生回答：不行，因为过于密植时，叶不能见光，不能进行光合作用，反而会减产。 教师引导：农民在种植时通常采用什么方式，结合本地实际情况。
学生回答：同一块地上，一年种两茬如小麦、玉米，这样一年可以两憝。有时玉米和小麦间
种等等。
教师总结：在农业生产中要充分利用阳光、土地等多种资源，创造最大的生物产量，像刚才
大家说的种植方式都属于立体农业的形式，复种、间作、套种。利用作物植株的
高低不同，生长发育阶段不同。利用作物生长的“时间差”，“空间差”，和“植
物光合作用差”等条件做到因地制宜。采用立体种植。创造最大的生物产量。
教师寄语：希望大家亲手种植、栽培农作物，可以独立完成，也可以结组，把学到的知识、
丰产增收的方法用到实际生产中，记录劳动过程中的体会、收获。相互交流，也
可以和老师探讨。
范文四：观察叶片的结构
种子的结构
教学目标:
1、了解绿色开花植物的生活史
2、了解种子的外形和颜色特征
3、掌握种子的结构,理解单子叶植物种子与双子叶植物种子在结构上的相同点和不同点 教学重点: 种子的结构及各部分的功能
教学难点: 描绘种子的结构
提前准备:1、绿色开花植物生活史挂图、标本、多媒体课件。
2、浸泡过的菜豆种子,玉米种子,黄豆种子, 放大镜,解剖刀,镊子,解剖盘,碘液、种子的结构挂图。
能力培养 :1、培养学生观察能力。
2、培养学生发现问题、提出问题、解决问题的能力。
3、重视激发学生的学习兴趣、培养合作精神。
教学设计:
一、 绿色开花植物的生活史:
师:请同学们观察挂图后,描述图中的绿色植物生活史。
生:种子 幼苗 成熟植物体 花 果实(含种子)
二、 观察菜豆种子的结构:
师:先观察实验桌上几种种子的外表形态,看看有什么特征?并出示种子结构挂图。 学生观察后,回答:
师:这个瘢痕就叫种脐它有什么作用?
学生挤压吸足水分的种子后,回答:种子吸收水分、有机养料的通道。
师:接下来,请同学们用镊子夹住豆粒,在种脐的对侧用解剖刀轻轻地划一个小口,将种皮
剥下来,露出里面的胚。然后掰开两片肥大子叶,用放大镜观察胚根、胚轴、胚芽等的位置及连接关系。
学生认真操作和观察。
三、观察玉米种子的结构:
师:请同学们先观察玉米外形,在玉米种子的一侧,透过厚皮可隐约看到什么?
生:里面的胚。
师:用镊子夹住玉米粒沿中线用解剖刀纵向切开,用放大镜观察纵切面。并比较玉米种子和与菜豆种子在结构上有何相同和不同之处?
学生认真观察,回答:
1、 玉米种子和菜豆种子都种皮和胚。
2、 不同的是菜豆种子没有胚乳、子叶2片,营养物质贮存在子叶中。
玉米种子有胚乳、子叶1片、营养物质贮存在胚乳中。
师:把一滴碘液滴在玉米种子的纵切面上,看有什么变化?
生:胚乳会变蓝色。
师:请同学们完成活动手册上练习题,并进行个别辅导。
学生认真做练习。
师:实验结束后,各组把种子带回去放在玻璃瓶中,观察种子萌发的过程看看
胚根发育成什么?胚芽发育成什么?胚轴发育成什么?
学生整理实验桌。
板书设计:略
课后反思:1、本课为实验课,学生容易观察和操作、学生都能认真观察、做练习,并且较感兴趣。
2、培养了学生的动手实践能力、观察能力,合作能力、激发了学习兴趣。
3、培养了学生发现问题、提出问题、解决问题的能力。
4、 本活动材料可以尽可能多几种植物种子,便于进行比较。突出双子叶植物和单子叶植物结构上的异同点.
范文五：叶片的结构
探究目标：
通过观察叶片的横切面和叶的表皮，掌握 叶片的基本结构和各部分的主要功能，从而认 识结构与功能相适应的辨证关系。
植物的叶片由哪几部分组成？
探 究
活 动 ：
叶脉 上表皮
叶肉
下表皮
表皮：
表皮细胞 ——排列紧密，无色透明，外壁 有角质层，主要起保护作用。 表皮 (分上下表皮)
保卫细胞 ——成对存在，中间的孔隙叫气孔， 可以进行气体交换。细胞内有叶绿体。
1 、在显微镜下观察，表皮细胞的颜色、形状和排列状况如何 呢？
2 、表皮细胞的这种结构特点对叶片进行光合作用有什么好处？ 3 、为什么雨后的莲叶上常有水珠滚动，但是水分并没有渗到 叶片的内部呢？
保卫细胞与其他细胞不同：它们的细胞壁厚薄 不均匀，靠气孔腔的外壁厚，不易伸展；背气孔 腔的内壁薄，较易伸展。细胞吸水膨胀时，内壁 伸展拉长，牵动外壁向内凹陷，使气孔张开；当 细胞失水收缩时，内外壁都拉直，使气孔闭合。
叶肉：
1、靠近上表皮的叶肉细胞与靠近下表皮 的叶肉细胞有什么不同？哪种叶肉细胞里含 的叶绿体较多？ 2、你能解释为什么叶片的上面比下面更 绿的原因吗？
3、叶肉细胞的主要功能是什么？
叶肉：
栅栏组织——接近上表皮，
细胞呈圆柱形，排列较整齐， 里面的叶绿体较多。
海绵组织——接近下表皮，
细胞形状不规则，排列较疏松 ，里面的叶绿体较少。
叶脉：
叶脉细胞的形状、排列方式如何？在叶片中起什 么作用？为什么？
具有支持作用
叶脉
具有输导作用
导管——输送水分和溶解在水中的无机盐。
筛管——输送有机物。
探究归纳:
（1）表皮细胞排列紧密，外壁有不易透水的角质层，从而起到保 护作用，表皮细胞无色透明，有利于光线的射入； （ 2 ）表皮上有气孔和保卫细胞，从而使叶片与外界能够有调节地 进行气体交换； （ 3 ）叶肉细胞里含有许多叶绿体，因而叶片能够进行光合作用；
（ 4 ）栅栏组织的细胞呈圆柱形，排列比较整齐，这有利于光线照 射在海绵组织上； （ 5 ）叶脉支撑着叶片，使叶片充分接受到阳光，内有管道，使光 合作用的原料和产物能够及时运输。
叶片有哪些结构与其能进行光合作用的功能相 适应？
演 稿
示 1
文
2 3 后 等
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拍手歌：
你拍一，我拍一，表皮细胞排列密； 你拍二，我拍二，叶肉里有叶绿体； 你拍三，我拍三，叶脉夹在叶肉间。
巩固提高：
1、 2、 3、 4、 5、
1
2
3 4
6、
5 6
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